Guitar Hero se joue en plugguant le révolutionnaire accessoire Guitar Grip sur votre DS que vous tenez verticalement grâce à une anse prévue à cet effet.
De plus, un stylet spécial en forme de médiator vous accompagne pour gratter avec fougue l’écran tactile. Plusieurs modes multi-joueurs en wifi sont proposés dont un mode co-op ainsi qu’un mode "Guitar Duel" dans lequel il faudra utiliser des attaques inédites et propres à la Nintendo DS.
Il faudra par exemple souffler dans le micro pour déjouer une attaque pyromane de votre adversaire, ou encore utiliser l’écran tactile afin de signer des autographes sur le tee-shirt d’un fan en délire. 5 scènes différentes sont à débloquer ainsi que 6 guitaristes dont 2 exclusifs pour la DS.