Ce jeu d'enquête sur DS mettra en scène le professeur Layton et son jeune assistant, Luke, dans une ville bien mystérieuse. Le cycle jour/nuit aura une incidence sur la population et la résolution des énigmes, signées par le spécialiste japonais du genre, le célèbre Akira Tago. Le jeu permettra également de récupérer divers objets au fil de l'aventure, des nounours et autres tapis de sol qui pourront parfaitement décorer la chambre d'hôtel du Professeur et de son assistant. Une compatibilité Nintendo Wi-Fi Connection est au programme, afin de télécharger gratuitement de nouvelles énigmes.