Rock Band permettra aux joueurs et à leurs amis de créer un groupe virtuel et de jouer les tubes des plus célèbres artistes de rock mondiaux en utilisant des périphériques comme une batterie, une basse, une première guitare et un micro. Grâce à des accords sans précédents entre les plus grands labels d'enregistrement et les éditeurs musicaux, la musique contenue dans Rock Band couvrira tous les styles de rock et inclura de nombreux tubes parmi les plus grandes chansons des plus célèbres artistes de tous les temps.
Les principaux éditeurs de musique, EMI Music Publishing et Warner/Chappell Music, ont en effet donné un accès sans égal à leurs gigantesques catalogues de musiques qui seront utilisées dans le jeu.
Les labels d'enregistrement, EMI Music, Hollywood Records, Sony BMG Music Entertainment, Universal Music Enterprises du groupe Universal Music Group et Rhino Entertainment, de Warner Music Group, ont également accepté de fournir les enregistrements principaux de leurs artistes.